果膠酯酶

 

果膠酯酶（pectinesterase）為pectin pectylhydrase之常用名，亦稱(chēng)為果膠酶、果膠甲酯酶、果膠氧化酶。為催化果膠的甲氧酯水解產(chǎn)生果膠酸和甲醇反應(yīng)的酶。EC3·1·1·11。除廣泛分布于高等植物外，已知在霉菌、細(xì)菌中也存在。對(duì)脫酯反應(yīng)的底物特異性尚不十分清楚。因此酶在高等植物中幾乎僅作用于甲酯，所以有對(duì)此酶應(yīng)使用果膠甲酯酶這一名稱(chēng)的意見(jiàn)。活性測(cè)定是以果膠為底物，對(duì)在一定條件下產(chǎn)生的羧基用堿定量；另也有通過(guò)對(duì)所產(chǎn)生的甲醇進(jìn)行定量的方法。最適pH為8—4，視酶源而異。一些陽(yáng)離子特別是Na+、Ca2+等可提高此酶的活性。

 

一種DNA構(gòu)建體，此構(gòu)建體包含編碼顯示果膠酯酶活性的酶的DNA序列，其中所說(shuō)的DNA序列包含：a）克隆進(jìn)存在于大腸桿菌DSMI0357中的質(zhì)粒pYES2．1中的DNA序列的果膠酯酶編碼部分，或b）a）中限定的DNA序列的類(lèi)似序列，該序列i）與a）中限定的DNA序列至少60%是同源的，或ii）與SEQIDNO：l中位置4-933中顯示的DNA序列在低嚴(yán)格性下雜交，或iii）編碼一種多肽，該多肽與白包含a）中限定的DNA序列的DNA序列編碼的多肽至少50%是同源的，或iV）編碼一種多肽，該多肽與針對(duì)由a）中限定的DNA序列編碼的純化的果膠酯酶產(chǎn)生的抗體是免疫反應(yīng)性的。

采用明膠加戊二醛包埋法和蛋殼微粒吸附法分別對(duì)黑曲霉果膠酯酶進(jìn)行了固定化，并研究了兩種固定化方法制備得到的固定化黑曲霉果膠酯酶的酶學(xué)性質(zhì)。結(jié)果表明，通過(guò)固定化，黑曲霉果膠酯酶的各項(xiàng)酶學(xué)性質(zhì)指標(biāo)都得到了改善，明膠固定化果膠酯酶和蛋殼固定化果膠酯酶的酶活回收率分別為46．3%和42.2%，而且與游離果膠酯酶相比，兩種固定化酶的最適溫度都由40℃上升到45℃，最適pH由4．4下降到4．0和4．2，Km值0．0113%由下降到0．0033%和0．0027%。 

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