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        核酸酶

           日期:2019-07-05     瀏覽:569    評論:0    
        核心提示:能夠將聚核苷酸鏈的磷酸二酯鍵切斷的酶,稱為核酸酶。核酸酶屬于水解酶,作用于磷酸二酯鍵的P-O 位置。 核酸酶是在核酸分解的第一步中,作用于水解核苷酸之間的磷酸二酯鍵的一種核酸。在高等動植物中都有作用于磷酸二酯鍵的。 不同來源的核酸酶,其專一性、作用方式都有所不同。有些核酸酶只能作用于RNA,稱為核糖核酸酶(RNase),有些核酸酶只能作用于DNA,稱為脫氧核糖核酸酶(DNase),有些核酸酶專一性較低,既能作用于RNA也能作用于DNA,因此統稱為核酸酶(nuclease)。根據核酸酶作用的位置不同,
        核酸酶
        能夠將聚核苷酸鏈的磷酸二酯鍵切斷的酶,稱為核酸酶。核酸酶屬于水解酶,作用于磷酸二酯鍵的P-O 位置。
        核酸酶是在核酸分解的第一步中,作用于水解核苷酸之間的磷酸二酯鍵的一種核酸。在高等動植物中都有作用于磷酸二酯鍵的。 
        不同來源的核酸酶,其專一性、作用方式都有所不同。有些核酸酶只能作用于RNA,稱為核糖核酸酶(RNase),有些核酸酶只能作用于DNA,稱為脫氧核糖核酸酶(DNase),有些核酸酶專一性較低,既能作用于RNA也能作用于DNA,因此統稱為核酸酶(nuclease)。根據核酸酶作用的位置不同,又可將核酸酶分為核酸外切酶(exonuclease)和核酸內切酶(endonuclease)。
        中文名:核酸酶
        外文名:nuclease
        作    用:催化磷酸二酯鍵
        特    點:專一性,降低反應活化能
        本    質:蛋白質
        分類介紹
        核酸外切酶
        有些核酸酶能從DNA或RNA鏈的一端逐個水解下單核苷酸,所以稱為核酸外切酶。只作用于DNA的核酸外切酶稱為脫氧核糖核酸外切酶,只作用于RNA的核酸外切酶稱為核糖核酸外切酶;也有一些核酸外切酶可以作用于DNA或RNA。核酸外切酶從3′端開始逐個水解核苷酸,稱為3′→5′外切酶,例如,蛇毒磷酸二酯酶即是一種3′→5′外切酶,水解產物為5′核苷酸;核酸外切酶從5′端開始逐個水解核苷酸,稱為5′→3′外切酶,例如:牛脾磷酸二酯酶即是一種5′→3′外切酶,水解產物為3′核苷酸。
        核酸內切酶
        核酸內切酶催化水解多核苷酸內部的磷酸二酯鍵。有些核酸內切酶僅水解5′磷酸二酯鍵,把磷酸基團留在3′位置上,稱為5′-內切酶;而有些僅水解3′-磷酸二酯鍵,把磷酸基團留在5′位置上,稱為3′-內切酶。還有一些核酸內切酶對磷酸酯鍵一側的堿基有專一要求,例如胰臟核糖核酸酶(RNaseA)即是一種高度專一性核酸內切酶,它作用于由嘧啶核苷酸C‘3處的羥基與下一個核苷酸C5’處的磷酸形成的3‘,5’-磷酸二脂鍵,產物為以3′嘧啶核苷酸結尾的低聚核苷酸和以5’核苷酸開頭的低聚核苷酸。
        發展歷史
        20世紀70年代,在細菌中陸續發現了一類核酸內切酶,能專一性地識別并水解雙鏈DNA上的特異核苷酸順序,稱為限制性核酸內切酶(restriction endonuclease,簡稱限制酶)。當外源DNA侵入細菌后,限制性內切酶可將其水解切成片段,從而限制了外源DNA在細菌細胞內的表達,而細菌本身的DNA由于在該特異核苷酸順序處被甲基化酶修飾,不被水解,從而得到保護。
        限制性核酸內切酶的研究和應用發展很快,已提純的限制性核酸內切酶有100多種,許多已成為基因工程研究中必不可少的工具酶。
        限制性核酸內切酶可被分成三種類型。Ⅰ型和Ⅲ型限制酶水解DNA需要消耗ATP,全酶中的部分亞基有通過在特殊堿基上補加甲基基團對DNA進行化學修飾的活性。
        Ⅰ型和Ⅲ型酶具有限制和修飾兩種作用,而特異性弱,切割位點的序列不固定,不已知,不宜用于基因克隆中。
        Ⅱ型限制酶水解DNA不需要ATP也不以甲基化或其它方式修飾DNA,能在所識別的特殊核苷酸順序內或附近切割DNA。因此,被廣泛用于DNA分子克隆和序列測定。
        本質研究
        關于網上描述核酸酶的本質是RNA,有一定誤區。
        首先,核酸酶的本質是蛋白質。
        1,核酸酶是由氨基酸合成的。
        2,從發展歷史上看:
        RNA的催化作用是在1985年Cech等人對四膜蟲rRNA自我剪接機制地深入研究時發現的 。而基因工程在1980年就成功做成世界上第一只轉基因動物(小鼠) 。也就說1980年就已經用核酸酶來切割DNA獲取目的基因了,而RNA類酶(核酶)的催化作用是在1985年才發現并提出來的。
        請注意區分核酶(Ribozyme,有生物催化功能的RNA)和核酸酶(RNAse/DNAse,水解核酸的酶) 

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        標簽: 核酸酶
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