茶多酚棕櫚酸酯

茶多酚棕櫚酸酯(Tea Polyphenol Palmitate)。

目前油溶性的特丁基對苯二酚(TBHQ)、丁基羥基茴香醚(BHA)和二丁基羥基甲苯(BHT)在國家標準(GB2760-2014)范圍內允許在油脂和含油脂的食品中使用。然而這類合成抗氧化劑有一定的毒性,在一些國家和地區使用已經受到限制，BHT在美國禁止使用,BHA在日本限制使用,TBHQ在日本禁止使用。
隨著人們對食品安全的關注度提高,各種無毒的脂溶性食品抗氧化劑也相應面世。2014年6月，國家衛計委發布了增補茶多酚棕櫚酸酯等兩種食品添加劑的公告，現已被收錄進GB2760-2014。茶多酚棕櫚酸酯是一種安全無毒的食品抗氧化，而且具有很好的保健功能，茶多酚棕櫚酸酯單體-EGCG棕櫚酸酯已經有很多這方面的報道。日本已經有茶多酚棕櫚酸酯的產品在市場上銷售。

隨著食品工業進步，對健康抗氧化劑需求越來越高，各種新型抗氧化劑也應運而生，例如迷迭香提取物(ROS)、茶多酚、茶多酚棕櫚酸酯、維生素E、抗壞血酸、抗壞血酸棕櫚酸酯(AP)、甘草抗氧化物、竹葉抗氧化物，如何篩選出抗氧化效果好的健康抗氧化劑顯得尤其重要。其中茶多酚棕櫚酸酯在2014年6月被國家衛計委收錄進GB2760-2014《食品安全國家標準食品添加劑使用標準》，是新型的油脂抗氧化劑。

以綠茶為原料提取的茶多酚經過與棕櫚酰氯酯化，過濾、水洗、脫溶、結晶、離心、凍干、包裝等步驟加工生產的食品添加劑茶多酚棕櫚酸酯。

感官要求:應符合下表的規定。

理化指標:應符合下表的要求。

本標準試驗方法中使用的部分試劑具有毒性或腐蝕性，按相關規定操作，使用時需小心謹慎。若濺到皮膚上應立即用水沖洗，嚴重者應立即治療。在使用揮發性酸時，要在通風廚中進行。

本標準所用試劑和水，在沒有注明其他要求時，均指分析純試劑和GB/T6682-2008規定的三級水。試驗中所用標準溶液、雜質標準溶液、制劑及制品，在沒有注明其他要求時，均按GB/T601、GB/T602、GB/T603的規定制備。試驗中所用溶液在未注明用何種溶劑配制時，均指水溶液。

A.3.1.1無水乙醇。

A.3.1.2硫酸。
A.3.1.3石油醚(沸點90C~120°C)。

A.3.1.4乙酸乙酯。

A.3.1.5香草醛。
A.3.1.6混合溶劑A:將石油醚與乙酸乙酯按體積比19:1混合均勻。
A.3.1.7香草醛顯色液:推確稱取1.0g的香草醛，溶解于100mL無水乙醇中，緩慢漓人20g硫酸，混勻并冷卻。

A.3.2茶多酚鑒別試驗
茶多酚棕澗酸酯是茶多酚的衍生物，在酸性條件下多酚類物質能和香草醛進行特征性顯色反應，可以通過顯色反應進行鑒別。
精確稱取10.0mg茶多酚棕桐酸酯樣品，置于10mL試管中。向試管加入4mL無水乙醇，震蕩使其溶解。再向試管中加入2mL香草醛顯色液，震蕩搖勻，靜置Smin,顯紅色者為茶多酚棕桐酸酯或茶多酚。
A.3.3與水溶性茶多酚的鑒別試驗
茶多酚棕櫚酸酯和水溶性茶多酚在油脂或者其它低極性容劑中溶解度差別很大，可以利用它們的溶解度差異將其分離。
稱取20mg~30mg茶多酚樣品置于10mL.離心試管1中，再加人5mL.混合溶劑A,震蕩溶解，在4000rpm下商心5min。將離心后的上清液轉移到另一10mL離心試管2中。再移取5mL混合溶劑A加入到離心試管1中，在4000rpm離心5min。將離心后的上清液轉移到離心試管2,合并上清液。將離心沉淀溶于10mL無水乙醇，記為沉淀液。分別移取1mL上清液和1mL沉淀液到10mL試管中，各自加入4mL香草醛顯色液，混合搖勻，等待5min顯色。
觀察顯色結果，如果上清液呈紅色，說明樣品中含有茶多酚棕櫚酸脂;如果沉淀液顯紅色，說明樣品中含有茶多酚;如果二者都顯紅色，說明樣品是茶多酚棕櫚酸酯和茶多酚的混合物。如果二者都不顯色，說明樣品中既不含茶多酚，又不含茶多酚棕櫚酸酯。

A.4.1試劑和材料

A.4.1.1茶多酚棕櫚酸酯:經45C真空干燥至位重后使用。

A.4.1.2維生素C:經45C真空干燥至恒重后使用

A.4.1.3沒食子酸乙酯:樣品經重結晶純化，高效液相色諧檢測純度99.9%。經45C真空干燥至恒重后使用。

A.4.1.4維生素C溶液:0.075moVL,準確稱取1,3222g維生素C,用水溶解后定容至100mL。

A.4.1.5三乙醇胺溶液:量取50.0mL三乙醇胺，加入25mL水稀釋后轉人100mL容量瓶中，并用水稀釋至刻度。
A.4.1.6沒食子酸乙酯標準儲備溶液:準確稱取0.1000g沒食子酸乙酯，用水溶解后定容至100mL。
A.4.1.7茶多酚棕櫚酸酯乙醇溶液:準確稱取約500mg茶多酚棕櫚酸酯(精確至0.1mg),記為茶多酚棕櫚酸酯干重m,用無水乙醇溶解并定容至100mI。
A.4.1.8酒石酸亞鐵溶液:準確稱取1.6050g硫酸業鐵(FeS04.7H20)和8.0440g酒石酸鉀鈉，分別用水溶解后轉入至1000mL容量瓶中，稀釋至刻度。
A.4.2分析步驟
A.4.2.1于25mL容量瓶中依次移入5ml酒石酸亞鐵溶液、1mL三乙醇胺溶液、2mL維生素C溶液，用水定容至刻度，充分播勻。此為空白溶液(1)。
A.4.2.2取5個25mL容量瓶分別依次加入5mL酒石酸亞鐵溶液、1mL三乙醇胺溶液、2mL維生素C溶液，然后用移液管分別移取0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL.的沒食子酸乙酯標準儲備溶液加到容量瓶中，以水定容至刻度，充分搖勻。配制好的溶液在室溫下放置1h。以空白溶液(1)為參照，在520umn波長下測定該溶液的吸光度，以沒食子酸乙酯標準溶液濃度對溶液吸光度建立沒食子酸乙酯標準曲線(標準曲線線性相關系數要求0.999以上)。
A.4.2.3于25mL容量瓶中依次移入5mL,酒石酸亞鐵溶液、1mL.三乙醇胺溶液、2mL維生素C溶液，移入1mL(記為體積v)的茶多酚棕櫚酸酯乙醇溶液(放液速度要慢),用少許無水乙醇吹洗瓶口的殘留液至容量瓶，以水定容至刻度，充分搖勻。配制好的溶液在室溫下放置1h,以空白溶液(1)為參照，在520nm波長下測定該溶液吸光度。所得吸光度在沒食子酸乙酯標準曲線上查到對應的依度c(μg/mL),該濃度乘以換算系數3.5,即為測得的茶多酚棕櫚酸酯濃度。

茶多酚棕櫚酸酶含量的質量分數w，按公式計算:

w=(3.5 x100x25xcx100%)÷vxmx1000
式中:

3.5-茶多酚棕櫚酸酯相對于沒食子酸乙酯的換算系數(等質量濃度沒食子酸乙酯和茶多酚棕櫚酸酯吸光值的比值);
c-測得的茶多酚棕櫚酸酯-亞鐵的吸光度在沒食子酸乙酯標準曲線上查到的對應濃度(ug/mL);
v-從100mL容量瓶移入到25mL容量瓶中的茶多酚棕桐酸酯乙醇溶液的體積(mL)(見A4.2.3);
m-茶多酚棕櫚酸酯干重(mg);
100-茶多酚棕櫚酸酯乙醇溶液的定容體積(mL)(A.4.1.7);

25一A.4.2.3的定容體積(mL);
1000-將茶多酗棕櫚酸酯的千重從mg換算成μg的換算系數。

稱取25.0g茶多酚棕櫚酸酯樣品，倒入250mL燒杯中，加入100g的植物油，攪拌條件下加熱到90~110°C，使其充分溶解(攪拌過程中，溶液表面伴有適量泡沫，屬正常現象)，然后冷卻至室溫觀察溶解性。如果植物油澄清，則茶多酚棕櫚酸酯的溶解度為≥25g/100g;如果植物油中有明顯的不溶物，則茶多酚棕櫚酸酶的溶解度為<25g/100g。

茶多酚棕櫚酸酯的添加量為0.02%~0.03%時抗氧化能力提高明顯。雖然添加量越大,抗氧化效果越好,但茶多酚棕櫚酸酯添加量在0.03%以上時抗氧化效果提高不明顯。添加0.03%茶多酚棕櫚酸酯的大豆油在62°C烘箱中儲存20d時,過氧化值為10meq/kg,完全符合食用植物油衛生標準。根據油脂貨架期的經驗推算方法可知，62°C烘箱試驗中油脂儲存1d相當于15°C下儲存30d,因此添加0.03%茶多酚棕櫚酸酯的大豆油在15°C條件下可以保存18個月(市場上植物油脂的保質期)。

稱取6份質量均為100g的大豆油，分別添加0.03%的BHA、BHT、TBHQ、茶多酚棕櫚酸酯、迷迭香、Vp,于62C烘箱中進行加速氧化試驗,同時做空白試驗。

在幾種常見的抗氧化劑中，茶多酚棕櫚酸酯在大豆油中抗氧化效果僅次于TBHQ,明顯好于天然抗氧化劑迷迭香、VE。有資料顯示脂溶性茶多酚在檸檬酸增效劑的協同作用。下,抗氧化效果和TBHQ無明顯差異。茶多酚棕櫚酸酯屬于同類產品，可能有類似的情況,有待進一步研究。迷迭香也是人們熟悉的產品,但其特有的氣味使其在一些產品中的應用受到限制,Ve相對來說抗氧化效果差些。

在100g豬油中添加0.03%茶多酚棕櫚酸酯,于62°C烘箱中進行加速氧化試驗，同時做空白試驗。

空白樣品的過氧化值在儲存6d后快速增加,儲存8d時過氧化值超過10meq/kg;添加茶多酚棕櫚酸酯樣品的過氧化值增加緩慢，儲存8d時,過氧化值小于6meq/kg。因此，茶多酚棕櫚酸酯在豬油中具有顯著的抗氧化效果。

在100g人造奶油中添加0.03%茶多酚棕櫚酸酯,于37°C烘箱中進行加速氧化試驗，同時做空白試驗。

在10~18d時，空白樣品的過氧化值低于添加茶多酚棕櫚酸酯的人造奶油,分析認為可能是由于制備樣品時,人造奶油經過加熱，而空白樣品則未加熱，而且人造奶油的氫化性質使得空白樣品比較穩定。在18d后空白樣品的過氧化值快速升高,迅速超過添加茶多酚棕櫚酸酯人造奶油樣品的過氧化值,而添加茶多酚棕櫚酸酯人造奶油樣品的過氧化值升高得比較慢,說明茶多酚棕櫚酸酯在人造奶油中具有明顯的抗氧化效果。
茶多酚棕櫚酸酯在大豆油中的最佳添加量為0.03%。茶多酚棕櫚酸酯與BHA、BHT、迷迭香、Ve。比較,其在大豆油中具有較強的抗氧化性,抗氧化性稍弱于TBHQ,但茶多酚棕櫚酸酯安全性更高。另外，茶多酚棕櫚酸酯在豬油和人造奶油中也顯現出良好的抗氧化性能。